Phân lập và đánh giá ảnh hưởng của các phân đoạn peptide từ lá cây thuốc thanh táo (Justicia gendarussa Burm F.) trên sự giải phóng của các cytokine tiền viêm in vitro
Cây thanh táo (Justicia gendarussa Burm f.) là một cây thuốc quý thuộc họ Acanthaceae mọc ở nhiều nơi tại Việt Nam và được sử dụng trong dân gian để chữa một số bệnh như: Đau xương, viêm khớp, giảm ho, hạ sốt, mụn nhọt…. Trong những năm gần đây, việc sử dụng các peptide tự nhiên có hoạt tính sinh học từ các loại thảo mộc để điều trị các bệnh mãn tính và cải thiện sức khỏe của con người được sử dụng rộng rãi. Trong nghiên cứu này, các peptide tự nhiên và peptide sau thủy phân của cây thuốc Thanh táo (TT) được phân lập và đánh giá ảnh hưởng trên sự giải phóng của các cytokine tiền viêm in vitro. Các phân đoạn peptide đã được phân lập bằng cột siêu lọc Amicon Ultra Centrifugal Filters (Millipore) với các mức cắt giảm khối lượng phân tử khác nhau (≤ 30 kDa, ≤ 10 kDa và ≤ 5 kDa), xác định độ sạch và khối lượng phân tử bằng phương pháp điện di trên gel Tricine-SDS-PAGE. Kết quả cho thấy, lá cây TT chiết bằng nước cất lạnh đã thu nhận được phân đoạn chứa peptide tự nhiên có khối lượng phân tử 14 kDa. Protein từ lá cây TT được thủy phân bằng pepsin và pancreatin trong 1 giờ đã thu nhận được phân đoạn peptide ≤ 10 kDa. Ảnh hưởng của các phân đoạn peptide trên các cytokine tiền viêm được đánh giá trên tế bào macrophage gây viêm bằng LPS và xác định sự giải phóng của các cytokine bằng phương pháp ELISA. Kết quả cho thấy, các phân đoạn peptide TT tự nhiên và peptide TT sau thủy phân thu nhận được với nồng độ (10 - 40 µg/mL) không gây độc với đại thực bào. Phân đoạn peptide TT sau thủy phân ≤ 10 kDa với nồng độ 10 - 40 µg/mL có khả năng ức chế sự giải phóng của TNF-α, IL-6 và IL-8 trên in vitro cao hơn so với phân đoạn peptide TT tự nhiên. Đây là cơ sở ban đầu để chứng minh tác dụng điều trị sưng viêm trong dân gian của lá cây TT
Research on technical measures for flowering regulation in single-petal pink peach trees in Sa Pa town, Lao Cai province
Thanh tao plant (Justicia gendarussa Burm f.) is a medicinal plant belonging to the Acanthaceae family that it grows in many places in Vietnam and is used in folk medicine to treat a number of diseases such as: bone pain, arthritis, cough relief, fever reduction, acne... In recent years, the use of bioactive natural peptides from herbs to treat chronic diseases and improve human health has been increasing. In this study, natural peptides and hydrolyzed peptides from proteins of thanh tao plant (TT) were isolated and evaluated for their effects on the release of inflammatory cytokines in vitro. Natural peptide fractions and hydrolyzed peptides from protein of TT leaves were isolated using Amicon Ultra Centrifugal Filters (Millipore) with different molecular weight cut-offs (≤ 30kDa, ≤ 10kDa and ≤ 5kDa). The purity and molecular weight of peptides were determined by Tricine-SDS-PAGE gel electrophoresis. The results showed that the leaves of the TT were extracted with cold distilled water to obtain the natural peptide with molecular weight (14 kDa). Protein from the TT leaves was hydrolyzed by pepsin and pancreatin for 1 hour to obtain a peptide fraction ≤ 10 kDa. The effects of peptide fractions on inflammatory cytokines were evaluated on LPS-induced macrophages. The release of inflammatory cytokines was determined by ELISA method. The natural TT peptide fractions and hydrolyzed TT peptide fractions obtained at concentrations (10 - 40µg/mL) had no effect on macrophages. The hydrolyzed TT peptide fraction ≤ 10 kDa at a concentration of 10 - 40µg/mL higher inhibit the release of TNF-α, IL-6 and IL-8 than the natural TT peptide fraction in vitro. This is the initial basis to demonstrate the folk anti-inflammatory effect of this medicinal plant leaf.